使用方法:
1、 称取本品56.5g,加入1000 mL蒸馏水或去离子水,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃灭菌15分钟。
2、 临用时加热溶化琼脂,冷至50℃,将放线菌酮0.4 g、多粘菌素E 0.02g、盐酸吖啶黄0.005g、头孢双硫唑甲氧0.002g、磷霉素0.01g溶于5mL乙醇和5mL水中制成混合溶液并过滤除菌, 每100 mL培养基中加入1mL混合溶液,摇匀后倾注灭菌培养皿。
3、 取待检菌划线接种于牛津琼脂平板上。于35℃培养24-48h。
4、 观察结果。李斯特氏菌在牛津琼脂平板上生长24h后菌落呈黑色,直径为1 mm,在其周围形成一个黑色环。培养48h,直径3-4 mm,除在菌落周围在一环外,在菌落中心部位的深层也形成黑点。挑取5个可疑菌落,接种于TSA-YE平板上,纯培养后进行鉴定。
质量控制:
质控菌株接种后于35℃培养24-48h,结果如下:
菌 名 | 菌 号 | 生长状况 | 培养特征 |
单核细胞增生李斯特氏菌 | CMCC(B)54002 | 良好 |
灰绿色菌落,中心凹陷黑色,周围有黑色,φ3-4mm
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大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 受抑制 | —— |
粪链球菌 | CMCC(B)32223 | 受抑制 | —— |