大肠杆菌大肠菌群测试片（ECC）使用说明
方法编号：5021
1 原理及适用范围：大肠杆菌（ E.coli / Coliform Count Plate）是一种预先制备好的一次性培养基产品，可以同时检测大肠杆菌和大肠菌群，含有大肠菌选择性培养基、冷水可溶性的吸水凝胶和半乳糖苷酶（GAL）和葡萄糖醛酸酶（GUD）指示剂。大肠杆菌显蓝色，其他大肠菌群显红色，蓝点加上红点为总的大肠菌群数。本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数，如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测，也可用于表面的卫生检测。
2 操作方法
2.1 样品处理：取样品 25 mL（g）放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内，振摇后成为1:100的稀释液。
2.2 接种：一般食品选1～2个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如饮用纯水和矿泉水等）可直接吸取原液进行检测。将大肠杆菌大肠菌群测试片（BE203）置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置5 min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下，每个稀释度接种两片。
2.3 培养： 将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。
3 结果判读: 培养后大肠杆菌显蓝色，其他大肠菌群显红色，蓝点加上红点为总的大肠菌群数。选择有阳性菌落的最高稀释度的测试片进行计数，然后乘以稀释倍数即为样品中每毫升（克）含有大肠菌群数。
4 附加说明
4.1我国的食品卫生标准大多都以大肠菌群（ Coliform ）作为检测指标，而欧盟等许多国家则以大肠杆菌(E.coli)作为检测对象，因此，本产品对于出口食品和国际航空配餐等企业具有更广泛的应用前景。
4.2 如果样品的酸碱度pH 7.0以下时，应先用灭过菌的碱性溶液（如1mol/LNaOH）调节到pH7.0-～8.0。
4.3大肠杆菌大肠菌群测试片对纯菌的检测灵敏度可达0.15 cfu/mL。
4.4一般食品对于大肠菌群的要求都比较严格，如果测试片上有成片的红点，或者中央没有红点，但边缘有很多红点，一定是已经严重超标，建议按多不可计来报告。
